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求takara反转录试剂盒说明书,货号RR047A,不胜感激

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求takara反转录试剂盒说明书,货号RR047A,不胜感激,求大佬施舍一个解决方案,感激不尽!

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2025-07-07 10:28:40

求takara反转录试剂盒说明书,货号RR047A,不胜感激】Takara反转录试剂盒(货号:RR047A)是一款常用于分子生物学实验中的关键工具,广泛应用于mRNA的逆转录反应中。该试剂盒适用于多种样本类型,包括总RNA、细胞裂解液或组织匀浆等。以下是对该试剂盒的简要总结,并以表格形式列出其主要信息和使用要点。

一、产品概述

项目 内容
产品名称 Takara 反转录试剂盒
货号 RR047A
应用领域 cDNA合成,qPCR前处理
样本类型 总RNA、细胞裂解液、组织匀浆等
酶类型 M-MLV反转录酶(野生型)
适用仪器 常规PCR仪或实时定量PCR仪
包装规格 100次反应

二、核心成分与功能

成分 功能
M-MLV反转录酶 将mRNA逆转录为cDNA
dNTP混合液 提供核苷酸原料,用于cDNA链延伸
引物(Oligo(dT) 或随机引物) 引导反转录反应,根据实验需求选择
缓冲液 提供最佳反应条件,维持酶活性
RNase抑制剂 防止RNA降解,保护模板完整性

三、使用流程概要

步骤 操作说明
1. RNA提取 使用合适的RNA提取试剂盒获得高质量RNA
2. 反转录反应 按照说明书配制反应体系,加入模板RNA和引物
3. 反转录程序 在PCR仪中进行适当的温度循环(通常为42℃孵育15-60分钟)
4. cDNA保存 反转录完成后,将产物分装并保存于-20℃

四、注意事项

事项 说明
RNA质量 必须确保RNA无降解,纯度高,避免影响反转录效率
酶活性 使用前检查酶是否失活,避免重复冻融
引物选择 根据实验目的选择合适的引物(如Oligo(dT)或随机引物)
保存条件 未使用的试剂应保存在-20℃,避免反复冻融
实验验证 推荐使用已知表达的基因进行阳性对照验证结果

五、常见问题与解决方法

问题 解决方法
cDNA产量低 检查RNA质量,增加模板量或优化反应时间
无扩增信号 确认引物设计正确,检查PCR条件是否合适
杂带多 优化退火温度,使用更特异的引物

如需获取完整的说明书,建议访问Takara官方网站或联系其中国代理商,也可通过学术资源平台(如CNKI、PubMed)查找相关文献资料。希望以上内容对您有所帮助,如有其他疑问,欢迎继续提问。

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