【pbst怎么配制】PBST(Phosphate Buffered Saline with Tween-20)是一种常用的缓冲液,广泛应用于生物实验中,如免疫组化、ELISA、细胞培养等。它在实验过程中起到清洗和稳定的作用。本文将对PBST的配制方法进行总结,并以表格形式展示。
一、PBST简介
PBST是磷酸盐缓冲液(PBS)中加入一定浓度的Tween-20(聚山梨酯-20)形成的溶液。其中,PBS提供稳定的pH环境,而Tween-20则有助于降低表面张力,提高洗涤效果,防止非特异性结合。
二、PBST配制步骤
1. 准备材料:
- 磷酸盐缓冲液(PBS)
- Tween-20
- 蒸馏水或去离子水
- 量筒、烧杯、磁力搅拌器(可选)
2. 计算用量:
通常PBST的配方为:
- PBS溶液(如1×PBS)
- 添加0.05%~0.1%的Tween-20
3. 混合溶液:
将所需量的PBS倒入烧杯中,加入适量的Tween-20,充分混匀。可使用磁力搅拌器帮助均匀混合。
4. 储存与使用:
PBST可在4℃下保存数天,使用前应检查是否有沉淀或变质现象。
三、PBST配制表(以1L为例)
成分 | 用量 | 说明 |
1×PBS | 1 L | 市售1×PBS或自制 |
Tween-20 | 0.5 mL~1 mL | 即0.05%~0.1%体积比 |
蒸馏水 | 补足至1 L | 可根据实际调整 |
混合方式 | 充分混匀 | 可用磁力搅拌器或手动摇晃 |
储存条件 | 4℃避光保存 | 一般可保存3~7天 |
四、注意事项
- 浓度控制:Tween-20浓度过高可能导致细胞毒性,过低则无法有效减少非特异性结合。
- 现配现用:PBST不宜长时间存放,建议每次实验前现配。
- 避免污染:配制时应使用无菌器具,防止微生物污染。
- pH值检查:若使用自制PBS,需确认pH值是否在7.2~7.4之间。
通过以上步骤和表格,可以快速、准确地配制出适合实验需求的PBST溶液。在实际操作中,可根据实验类型和试剂来源灵活调整配方比例。